怎樣選擇在線保護(hù)柱，又不影響分離分析？這是色譜工作者經(jīng)常提出的一個(gè)問題。通常，在選擇保護(hù)柱之前首先要考慮的是樣品是否清潔。對(duì)于大部分分析工作者來(lái)說，一只1cm長(zhǎng)的保護(hù)柱便能提供充分的保護(hù)作用。但是，如果樣品非常不清潔，或工作中發(fā)現(xiàn)要經(jīng)常更換1cm的保護(hù)柱，那么就應(yīng)選擇2cm或3cm長(zhǎng)的保護(hù)柱。保護(hù)柱越長(zhǎng)，自然所裝填的色譜填料越多，則其越能避免污染物進(jìn)入分析色譜柱的機(jī)會(huì)。當(dāng)然，隨著保護(hù)柱的長(zhǎng)度加長(zhǎng)，樣品的保留時(shí)間會(huì)比使用短保護(hù)柱長(zhǎng)。一般來(lái)說，保護(hù)柱的內(nèi)徑與分析色譜柱的內(nèi)徑相同或相當(dāng)即可。

　　在線保護(hù)柱的使用與維護(hù)：

　　a.保護(hù)柱的使用

　　一個(gè)新的保護(hù)柱芯是沒有方向的，但是從初次使用時(shí)開始保護(hù)柱芯，就賦予了方向，因?yàn)楣腆w顆粒物質(zhì)和強(qiáng)保留物質(zhì)總是從入口端到達(dá)保護(hù)柱，并在這一端開始累積。所以柱芯在開始使用后應(yīng)確認(rèn)好方向。

　　當(dāng)發(fā)現(xiàn)分析過程出現(xiàn)柱壓太高、柱效下降或分離度下降等影響分離的因素的時(shí)候，需要對(duì)保護(hù)柱進(jìn)行維護(hù)，如在維護(hù)之后還是沒有得到改善則應(yīng)考慮更換色譜柱。

　　b.保護(hù)柱的維護(hù)方法

　　先在柱套上做好標(biāo)記，確認(rèn)保護(hù)柱芯的正反方向；取下保護(hù)柱，在不打開卡套的前提下將保護(hù)柱反接（注意此時(shí)不能接色譜柱），用甲醇：水=20：80以3ml/min流速?zèng)_洗10min，然后再用純甲醇以3ml/min流速?zèng)_洗10min；然后，在沖完以后將保護(hù)柱正接，打開泵除去保護(hù)柱和連接管內(nèi)的空氣，再連接好色譜柱，像往常一樣使用。